潮霉素B是一種用于重組克隆的抗生素,用于篩選已轉化為所需DNA序列的細胞。它通過抑制蛋白質合成來殺死未轉化的敏感細胞。該化合物可用于細菌、真菌、植物和植物,以及哺乳動物細胞培養物。由土壤中的放線菌吸濕鏈霉菌產生,潮霉素B也被添加到雞和豬的飼料中,以防止它們被寄生蟲等寄生蟲感染。潮霉素B是一種用于重組克隆的抗生素。放線菌是一種常見的土壤細菌,它們產生多種對其他動物有毒的天然產物幫助它們在土壤中競爭和生存的有機體。從這些有機體中分離出許多不同類型的抗生素,包括鏈霉素和放線菌素。
潮霉素B于1953年被發現。雖然對人類有毒,潮霉素初的用途是增加家禽和豬的食物,以防止蠕蟲感染。一些患者在服用抗生素時會產生有害的副作用。潮霉素B是氨基糖苷類抗生素的一個例子。它由糖組成,其上有氨基。幾種不同的種類有人發現細菌對這種抗生素有耐藥性,這種耐藥性是由抗生素分子上的一個磷酸基轉移到一個羥基OH基而激活的,進行這種反應的蛋白質稱為潮霉素B磷酸轉移酶(Hph),潮霉素B的作用機理是抑制蛋白質通過影響信使核糖核酸(mRNA)的翻譯來合成蛋白質。蛋白質由長鏈氨基酸組成通常情況下,核糖體沿著一條信使核糖核酸鏈移動,并根據一組稱為密碼子的信使核糖體產生氨基酸。
當抗生素存在時,核糖體不能正確讀取密碼子并錯誤翻譯。通常,這會導致蛋白質合成的終止。
隨著重組DNA技術的出現,科學家們能夠從幾種不同類型的細菌中克隆出Hph基因。在制造抗生素的放線菌中發現了一種基因,另一種是在革蘭氏陰性菌大腸桿菌和肺炎克雷伯菌中發現的。由于大腸桿菌在基因工程中被廣泛操縱,它的基因是實驗中常用的一種。這種抗生素的作用方式不同于其他抗生素,這一潮霉素B抗性基因被廣泛用作克隆實驗中的一個選擇標記。
因此,它用于重組質粒上,該重組質粒還含有科學家希望將其引入生物體(如真菌或植物細胞系)的基因。在一個大的細胞混合物中,通常只有少數細胞具有所需的質粒。當在細胞混合物中添加抗生素時,它會殺死沒有攜帶重組質粒的敏感細胞,潮霉素B選擇確保剩余細胞繼續含有感興趣的基因。服用某些抗生素可能會干擾避孕藥的效果。
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