什么是胎牛血清?
胎牛血清是通過母牛剖腹產胎牛心臟密閉穿刺采血獲得的新鮮胎牛全血,經自然層析、離心后收集得到去除血細胞、纖維蛋白等成分的淡黃色透明上清液體,后經生產使用多級高置流膜過濾技術和三級0.1?m終端微濾方法處理后,常用于細胞培養相關實驗。
正確地使用胎牛血清可分為以下四個方面:
1. 正確儲存,避免反復凍融
1) 血清在-20°C凍存。
2) 血清避免反復凍融,以免降低因子活性。如一次用不完,應進行分裝。
3) 血清和培養基應盡可能“現用現配”,配好的培養液,應于一周內用完。
4) 血清避免在4°C或更高溫度靜置過久,否則會破壞血清中有效活性成分,影響血清品質。
2. 正確的融化
上流行的【血清融化三步法】可大限度地保存血清中因子的活性,不會產生沉淀,同時能縮短血清融化時間。
3. 關于胎牛血清的滅活
真正的胎牛血清因為胎牛沒有形成有效補體,如果針對補體滅活的話,就不需要。其他情況根據實驗設計來決定。
4. 胎牛血清的濃度
胎牛血清通常是以2%~20%的比例加到基礎培養基中,混合后配成*培養基。
曾有文獻報道,不同胎牛血清濃度對細胞存在一定的影響,尤其是干細胞和原代細胞。具體佳濃度需要用戶根據自己的實驗來確定,以既保證培養的效果,又避免血清的浪費。
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